货号

H103

种属

人

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

悬浮 淋巴母细胞样 成团聚集

培养条件

培养基
：a-MEM（无核酸，有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠） +43.2μg/mL Inositol+8.82μg/mL Folic acid+0.1mM 2-巯基乙醇+12.5%FBS+12.5%HS+1% P/S（推荐HAKATA优等胎牛血清
，货号:HN-FBS-50; 马血清
，货号
：HM-FBS-50）

温度：37℃     气相
：95%空气,5% CO2

传代

1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒
，将其竖直置于培养箱中进行2-4小时的缓冲
，.然后置于无菌操作台
，打开瓶口，小心吸取上层培养基
，留2-4ml培养基以将大部分细胞留在培养瓶底部，加入新鲜培养基。吸取出的旧培养基1000r/min 离心5min后
，去除上清，根据细胞数量决定是合到一起还是另行取新培养瓶培养。根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液或传代
，每2至3天加入新鲜培养基（根据细胞密度）,尽量少用离心的方式换液;

2. 通过添加新鲜培养基来维持培养

。或者可以通过离心去除旧培养基
，再加入新培养基并以2-3×10⁵个活细胞/mL的密度再悬浮进行培养

。建议将细胞密度维持在2×10⁵个至1×10⁶个细胞/mL之间
。当细胞团过大时可轻轻吹打成小细胞团，不要吹打过度

。

保存

冻存条件
：90%FBS+10%DMSO

(备注
：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。)

保存条件：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂
，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以88bifa会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）

3.细胞漂浮

：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱

。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%
，进行消化传代；如细胞还是不贴壁
，将细胞离心收集转到新培养瓶
，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，88bifa的技术人员会一直跟踪指导
，直到问题解决。